嗜热革节孢第十二家族内切葡聚糖酶的定点突变

• 作者: 刘娇娇 刘宁 刘玉姣 李多川 王欢
• 来源期刊: 山东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 内切葡聚糖酶 定点突变 酶活性 酶学性质
• 年，卷（期）: 2018,（7）
• 所属期刊栏目: 生物技术·遗传育种·种质资源
• 页码范围: 55-60,66
• 页数: 7页
• 分类号: S188+.3
• 字数: 4321字
• 语种: 中文
• DOI: 10.14083/j.issn.1001-4942.2018.07.010

摘要

纤维素酶有广泛的应用前景,探究纤维素酶的性质及其催化作用机制有重要意义.本研究对嗜热革节孢第十二家族内切葡聚糖酶steg1基因进行定点突变,研究突变对酶活性的影响.选择位于酶催化活性通道上的6个氨基酸位点(N35、W37、Y77、W128、Y145、N168)进行突变,得到8个突变酶(N35Q、W37H、Y77F、W128S、Y145F、Y145A、Y145W、N168Q).结果显示,与野生酶WT相比,所有突变酶的活性降低,其中突变酶Y77F、W128S、Y145A的Km值和kcat值都降低;N35Q的Km和kcat值都升高;W37H、Y145F、Y145W、N168Q的Km值升高,kcat值降低.WT与突变酶的最适pH值为5.0,均保持不变.突变酶Y77F、N35Q的最适温度降低到50℃,WT和其余突变酶的最适温度为55℃.突变酶Y77F和N35Q在60℃处理10 min后分别保持49.34％和22.90％的活性,WT和其余突变酶在60℃处理10 min后都失活.本研究为探究内切葡聚糖酶的催化作用机理以及分子改造奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘宁	山东农业大学植物保护学院	42	545	12.0	22.0
2	李多川	山东农业大学植物保护学院	73	827	17.0	23.0
3	王欢	山东农业大学植物保护学院	8	22	3.0	4.0
4	刘玉姣	山东农业大学植物保护学院	3	6	2.0	2.0
5	刘娇娇	山东农业大学植物保护学院	2	4	1.0	2.0