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摘要:
本研究将嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶EGⅠ中的底物结合位点精氨酸Arg7进行饱和突变,测定其性质、动力学参数的变化,以期分析精氨酸Arg7的功能.结果表明,与原酶相比,突变酶R7 A的Km有所下降,R7P的kcat显著性提高,但突变酶的kcat/Km均显著性降低.原酶的最适反应温度为50℃,突变酶R7C、R7P和R7V的则为40℃,其余突变酶的均为50℃.原酶于70℃下处理2 h具有61%的活性,相同处理条件下,突变酶R7F、R7H仍具有70%以上的活性,说明其热稳定性明显提高,R7A仅有20%的活性,剩余突变酶均有40%左右的活性.原酶的反应最适pH值为5.0,而突变酶R7C的为6.0,剩余突变酶的均为5.0.本试验探究了精氨酸Arg7饱和突变后嗜热革节孢GH45家族内切葡聚糖酶的性质变化,可为GH45家族进一步的分子改造和功能研究提供参考.
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关键词热度
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文献信息
篇名 嗜热革节孢内切葡聚糖酶EGⅠ中精氨酸Arg7的功能分析
来源期刊 山东农业科学 学科 生物学
关键词 嗜热革节孢 内切葡聚糖酶 饱和突变 酶学性质 热稳定性
年,卷(期) 2020,(2) 所属期刊栏目 生物技术·遗传育种·种质资源
研究方向 页码范围 19-26
页数 8页 分类号 Q783
字数 4819字 语种 中文
DOI 10.14083/j.issn.1001-4942.2020.02.004
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 李多川 山东农业大学植物保护学院 73 827 17.0 23.0
2 于伟帅 山东农业大学植物保护学院 1 0 0.0 0.0
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研究主题发展历程
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内切葡聚糖酶
饱和突变
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研究起点
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期刊影响力
山东农业科学
月刊
1001-4942
37-1148/S
大16开
济南市工业北路202号
24-2
1963
chi
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