黑木耳内切葡聚糖酶基因克隆与原核表达

• 作者: 孙健 孙婷婷 王旭彤 邹莉
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 黑木耳 内切葡聚糖酶 基因克隆 生物信息学分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2019,（3）
• 页码范围: 308-315
• 页数: 8页
• 分类号: S646.6|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2019.4587

摘要

克隆了黑木耳(Auricularia auricular-judae)内切葡聚糖酶(endoglucanase)基因并进行序列分析,此外,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达.研究基于前期测得的黑木耳转录组数据,同时结合基因组数据(Gen-Bank登录号为NEKD00000000.1),筛选到黑木耳内切葡聚糖酶基因序列并设计特异引物,以黑木耳菌丝总RNA为模板,采用RT-PCR技术克隆黑木耳内切葡聚糖酶基因cDNA全长,命名为Aa-eg,构建了重组原核表达载体pET32a-Aa-eg并成功在大肠杆菌中表达.序列分析表明,cDNA全长为1242 bp,编码413个氨基酸,预测该蛋白分子量为43.59 ku,理论等电点为4.42,存在信号肽.由于pET-32a载体包含20.0 ku的标签,SDS-PAGE分析在45.0 ku和66.2 ku之间出现目的蛋白条带,与理论预期值大小一致.通过对黑木耳内切葡聚糖酶基因的克隆及分析,为进一步揭示黑木耳内切葡聚糖酶基因功能奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹莉	东北林业大学林学院	100	882	13.0	26.0
2	孙婷婷	哈尔滨学院食品工程学院	5	2	1.0	1.0
3	王旭彤	东北林业大学林学院	13	10	2.0	3.0
4	孙健	东北林业大学林学院	17	52	5.0	6.0