SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺中抗体基因稳定性

• 作者: 乔玉玲 南建军 姜英 安晨 宋兰兰 房世娣 毛晓燕 熊颖 王建锋 秦海艳 陈继军
• 来源期刊: 微生物学免疫学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: SYBR Green 实时定量PCR 灌注培养 基因稳定性 工程细胞株
• 年，卷（期）: 2018,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 20-24
• 页数: 5页
• 分类号: Q75|Q813
• 字数: 3278字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13309/j.cnki.pmi.2018.01.004

摘要

目的 采用SYBR Green实时定量PCR分析灌注培养工艺过程中工程细胞株抗体基因的稳定性.方法取灌注培养0、7、14、21、28、35 d的CHO细胞,用SYBR Green实时定量PCR分析其抗体基因稳定性.使用标准曲线相对定量法分析CHO细胞中β-肌动蛋白和抗体基因拷贝数,以抗体基因拷贝数与β-肌动蛋白基因拷贝数的比值表示工程细胞中抗体基因水平.结果 工程细胞株工作种子、发酵罐中不同时间点样品抗体基因拷贝数保持稳定,抗体基因拷贝数相对β-肌动蛋白基因为0.93±0.10,抗体基因相对含量与培养时间之间不相关( P = 0.938).结论抗体工程细胞株在灌注培养过程中抗体基因保持稳定.