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Bacteroides coprocola菌 β-葡萄糖苷酶基因的表达纯化及活性测定
Bacteroides coprocola菌 β-葡萄糖苷酶基因的表达纯化及活性测定
作者:
应晓敏
路迪
邢雅玲
钱露
韩洋
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
拟杆菌属
β-葡萄糖苷酶基因
原核表达
蛋白纯化
活性检测
摘要:
目的 构建一种拟杆菌Bacteroides coprocola(BC)β-葡萄糖苷酶基因的原核表达载体,并纯化该 β-葡萄糖苷酶,检测其水解不同底物的能力.方法 以NCBI数据库中提供的BC菌 β-葡萄糖苷酶基因序列为参考,合成出该基因的全长序列,测序正确后插入到含GST基因的原核表达载体pGEX-4T-1中;以IPTG诱导表达,并经谷胱甘肽琼脂糖珠纯化融合蛋白;SDS-PAGE和Western印迹检测 β-葡萄糖苷酶基因的表达,并通过不同底物检测其活性及比较各法的优劣.结果 PCR扩增结果与双酶切实验表明,原核表达载体构建成功;Western印迹结果显示,β-葡萄糖苷酶基因在大肠杆菌中特异表达;酶活性实验表明,该菌 β-葡萄糖苷酶在对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(4′-nitrophenyl-beta-D-glucopyranoside,pNPG)和京尼平苷(geniposide)中均有活性,且用pNPG作为底物测定的活性结果更可靠.结论 用两种底物成功检测出纯化的BC菌 β-葡萄糖苷酶的活性,为进一步研究其功能奠定了基础.
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文献信息
篇名
Bacteroides coprocola菌 β-葡萄糖苷酶基因的表达纯化及活性测定
来源期刊
军事医学
学科
医学
关键词
拟杆菌属
β-葡萄糖苷酶基因
原核表达
蛋白纯化
活性检测
年,卷(期)
2018,(10)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
753-756
页数
4页
分类号
R378.2
字数
3588字
语种
中文
DOI
10.7644/j.issn.1674-9960.2018.10.007
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
应晓敏
军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
3
0
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0.0
2
韩洋
军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
1
0
0.0
0.0
3
路迪
军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
1
0
0.0
0.0
4
钱露
军事科学院军事医学研究院军事认知与脑科学研究所
1
0
0.0
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5
邢雅玲
军事科学院军事医学研究院辐射医学研究所
1
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研究主题发展历程
节点文献
拟杆菌属
β-葡萄糖苷酶基因
原核表达
蛋白纯化
活性检测
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
军事医学
主办单位:
军事医学科学院
出版周期:
月刊
ISSN:
1674-9960
CN:
11-5950/R
开本:
大16开
出版地:
北京太平路27号
邮发代号:
82-757
创刊时间:
1956
语种:
chi
出版文献量(篇)
4313
总下载数(次)
13
总被引数(次)
15987
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