牦牛bta-miR-1434-5p和Smad1基因组织表达谱及荧光素酶报告载体构建

• 作者: 商鹏 席广银 强巴央宗 徐业芬 牛家强 王玉恒 索朗斯珠 赵良栋 郭敏
• 来源期刊: 中国农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 牦牛 bta-miR-1434-5p Smad1基因 组织表达谱 载体构建
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 页码范围: 52-59
• 页数: 8页
• 分类号: S814.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11841/j.issn.1007-4333.2018.05.06

摘要

为探索牦牛Smad1基因与bta-miR-1434-5p是否存在靶向关系,探究bta-miR-1434-5p分子调控可能机制,利用RT-PCR技术对bta-miR-1434-5p和Smad1 mRNA在牦牛组织中的表达谱进行检测,并构建pmiR-RB-REPORT?双荧光素酶报告载体对牦牛Smαd1基因3'端非翻译区(3'UTR)与bta-miR-1434-5p的靶向关系进行研究.结果表明:Smad1基因mRNA在牦牛下丘脑、垂体、心、肝、脾、肺、肾、骨骼肌、淋巴结、卵巢、输卵管、子宫组织中均有广泛表达;bta-miR-1434-5p除在牦牛输卵管中没有表达外,在其他组织均与Smad1基因mRNA共表达;获得牦牛Smad1基因3'UTR序列并成功构建野生型及突变型pmiR-RB-REPORT?双荧光素酶报告质粒;荧光素酶活性检测发现bta-miR-1434-5p mimics对Smad1野生型质粒报告荧光没有明显的下调作用,由此推测bta-miR-1434-5p与牦牛Smad1基因的该段3'UTR之间未发现明显互作.