SOX9慢病毒表达载体的构建及其在LNcap细胞中的稳定表达

• 作者: 何颖红 张小玉 段君君 汪小波 王江 贾霄
• 来源期刊: 昆明医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: SOX9 慢病毒表达载体 LNcap细胞 脂质体转染
• 年，卷（期）: 2018,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 5-9
• 页数: 5页
• 分类号: Q786
• 字数: 3057字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2018.02.002

摘要

目的 构建SOX9基因慢病毒表达载体,建立稳定表达SOX9的LNCaP细胞株.方法 PCR扩增SOX9基因,将其克隆到慢病毒表达载体pLVX-IRES-Puro中,双酶切和测序鉴定重组质粒.用HEK293细胞包装重组病毒颗粒并感染LNcap细胞,经puromycin筛选获得稳定转染细胞株.qRT- PCR和Western Blot分别检测SOX9 mRNA水平及蛋白表达.结果 经双酶切和测序鉴定证实目的片段已插入到慢病毒表达载体上.重组质粒转入LNCaP细胞后经puromycin抗性筛获得稳定表达的细胞株,qRT- PCR检测到SOX9基因在转录水平的表达, Western blot分析显示SOX9蛋白高表达.结论 慢病毒表达载体pLVX-IRES-FLAG-SOX9构建成功,实现了SOX9在LNcap细胞中的外源性表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	段君君	大理大学基础医学院	3	2	1.0	1.0
5	张小玉	大理大学基础医学院	3	2	1.0	1.0
9	王江	大理大学基础医学院	3	2	1.0	1.0
13	贾霄	大理大学基础医学院	4	2	1.0	1.0
17	何颖红	大理大学基础医学院	5	4	2.0	2.0
21	汪小波	大理大学基础医学院	2	2	1.0	1.0