板栗CmWRKY基因的克隆、序列分析与原核表达

• 作者: 刘应高 刘裕峰 朱天辉 李姝江 谯天敏 韩珊 龙旭梅
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 板栗 CmWRKY 基因克隆 序列分析 原核表达
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源·生物技术
• 页码范围: 37-45
• 页数: 9页
• 分类号: Q785|Q786|S664.03
• 字数: 6898字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.201751408

摘要

为深入研究板栗WRKY转录因子基因在板栗抗病过程中的分子作用机制,根据板栗转录组数据库分析获得EST序列,利用RT-PCR技术,克隆板栗WRKY转录因子cDNA(CmWRKY)序列,分析CmWRKY基因及其编码蛋白的相关信息并进行原核表达研究.结果表明,CmWRKY基因为1437 bp,编码479个氨基酸,推测蛋白分子质量为52.12896 ku,理论等电点为9.15,具有2个WRKY保守结构域和2个C2H2锌指结构域,属于WRKY家族的第Ⅰ组,基因登录号为KY312850.1.CmWRKY核苷酸序列与巴旦木等植物的WRKY基因一致性均在80％以上,与西班牙栓皮栎WRKY基因一致性最高,达到97％.同源建模表明,CmWRKY蛋白三级结构与拟南芥AtWRKY1蛋白结构相似,推测其可能与AtWRKY1具有相似的调控功能.分子进化分析显示,板栗CmWRKY与西班牙栓皮栎及核桃WRKY蛋白亲缘关系最近.SDS-PAGE蛋白电泳分析表明,CmWRKY蛋白最佳诱导表达条件为0.2 mmol/L IPTG在30℃下诱导10 h,蛋白分子质量为56 ku,其主要以可溶性蛋白的形式存在.为板栗CmWRKY基因的生物学功能研究及应用奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘应高	四川农业大学林学院	43	277	10.0	14.0
2	朱天辉	四川农业大学林学院	167	1369	19.0	26.0
3	李姝江	四川农业大学林学院	48	189	9.0	11.0
4	韩珊	四川农业大学林学院	34	182	8.0	12.0
5	谯天敏	四川农业大学林学院	37	157	8.0	10.0
6	刘裕峰	四川农业大学林学院	7	3	1.0	1.0
7	龙旭梅	四川农业大学林学院	4	9	2.0	3.0