淇河鲫R-spondin1基因cDNA克隆和表达

• 作者: 刘慧芬 吴利敏 李学军 李永婧 李牧童 桑甜 段胜华 王磊 田雪 董传举 马晓 魏会哲
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 淇河鲫 Rspo1 克隆 卵巢分化 性逆转
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 页码范围: 731-741
• 页数: 11页
• 分类号: Q786|S917.4
• 字数: 6436字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20180511273

摘要

为探索R-spondin1 (Rspo1)基因在雌核发育三倍体鱼淇河鲫性别决定与分化过程中的作用,本研究利用RACE技术克隆Rspo1基因cDNA序列,同时分析它的时空表达模式,并检测芳香化酶抑制剂Letrozole及高温养殖诱导性逆转下它在性腺中的表达情况.将扩增的PCR产物经亚克隆测序、拼接后获得淇河鲫Rspo1 cDNA序列,长1 243 bp(MH243761),包含5'非编码区318 bp,3'非编码区127 bp和开放读码框798 bp,共编码265个氨基酸残基.氨基酸序列比对及系统进化分析结果显示,淇河鲫Rspo1与其他鲤科鱼类同源性较高,与哺乳类、爬行类等脊椎动物同源性相对较低;组织分布检测结果显示,Rspo1基因在淇河鲫各个组织中均有表达,其中肌肉组织表达量最高,卵巢次之,而在脾脏、肾脏、心脏组织中表达量较低;在胚胎发育过程中Rspo1的表达量在未受精卵与受精卵中无差异,随着胚胎发育而降低,神经胚期最低,从尾芽期至出膜期又逐步升高.胚后阶段,Rspo1在性腺中的表达量从淇河鲫性别决定与分化关键时期(孵化后20d)开始上调.Letrozole处理或高温养殖引起的性逆转中,Rspo1在性腺中表达量升高.研究表明,淇河鲫Rspo1作为一个母源性因子可能在卵巢分化与维持中起到一定作用,同时它可能也参与精子发生过程.