实时荧光PCR检测巴西孢子丝菌的实验方法的建立

• 作者: 周盈 姚春丽 张明瑞 李福秋 杨鑫 赵飞 龚杰
• 来源期刊: 中国真菌学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 实时荧光PCR 巴西孢子丝菌 鉴定 感染动物模型
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 297-302
• 页数: 6页
• 分类号: R446.5|R379.9
• 字数: 4453字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-3827.2019.05.008

摘要

目的 建立一种快速、特异、灵敏的荧光PCR方法 检测巴西孢子丝菌.方法比对NCBI数据库中所有巴西孢子丝菌内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)序列,在保守区域设计并合成特异性引物和探针,建立并优化荧光PCR检测方法.对优化后的方法使用标准浓度核酸进行扩增效率、灵敏度及特异度评价.通过巴西孢子丝菌小鼠感染模型,与组织培养比较,对本研究中的方法进行评价.结果 建立的实时荧光PCR方法对巴西孢子丝菌的检测限为100fg.该方法对申克孢子丝菌、球形孢子丝菌、其他常见致病真菌28种、常见细菌3种以及人类基因组和小鼠基因组扩增结果均为阴性,特异度为100％.对巴西孢子丝菌感染小鼠脑、肝、肺、脾、肾及淋巴结检测与培养结果相一致.结论 本研究建立的荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地鉴定巴西孢子丝菌,并能够有效的对感染小鼠模型标本进行检测,有助于孢子丝菌病的早期特异性病原学诊断.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚春丽	吉林大学第二医院皮肤科	38	112	6.0	9.0
2	李福秋	吉林大学第二医院皮肤科	85	413	9.0	18.0
3	赵飞	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	36	130	7.0	10.0
4	周盈	吉林大学第二医院皮肤科	5	29	3.0	5.0
5	张明瑞	吉林大学第二医院皮肤科	6	13	2.0	3.0
6	龚杰	中国疾病预防控制中心传染病预防控制所	5	0	0.0	0.0
7	杨鑫		4	10	1.0	3.0