高活性纤溶酶菌株筛选与基因克隆表达

• 作者: 王志会 谢和
• 来源期刊: 山地农业生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 纤溶酶 基因克隆 序列分析 表达
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7
• 页数: 7页
• 分类号: Q939.9
• 字数: 4825字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2019.02.001

摘要

本研究以本实验室曾在酒曲、酒糟、窖泥等样品中分离的具有酱香味的13株菌株作为出发菌株,经脱脂奶粉平板、纤维蛋白双层平板筛选出纤溶酶活性最高的菌株GZHZV-8,结合形态学特征、生理生化特征及16S rDNA序列同源性分析,GZHZV-8菌株为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens).以GZHZV-8菌株总DNA为模板扩增出纤溶酶基因的编码区,与pMD18-T载体连接、转化至大肠杆菌(Escherichia coli)DH5α,分析表明纤溶酶基因开放阅读框包含1092 bp碱基,编码363个氨基酸.纤溶酶基因与表达载体pET-22b(+)连接转化至E.coli BL21中表达,表达菌株经IPTG诱导表达分泌活性纤溶酶,培养后测得发酵上清液、菌体细胞破碎上清液和菌体细胞破碎沉淀的纤溶酶活力分别为613.26 IU/mL、407.38 IU/mL、993.12 IU/mL.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢和	贵州大学生命科学学院	37	366	12.0	18.0
2	王志会	贵州大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0