施氏假单胞菌胞内NapA/NapB蛋白的多克隆抗体制备及蛋白免疫印迹分析

• 作者: 周萌 柴晓利
• 来源期刊: 山东化工
• 学科: 生物学
• 关键词: 反硝化脱氮 施氏假单胞菌 NapA/NapB 蛋白免疫印迹
• 年，卷（期）: 2019,（20）
• 所属期刊栏目: 科研与开发
• 页码范围: 25-28,31
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3574字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-021X.2019.20.010

摘要

旨在探究利用蛋白免疫印迹手段测定施氏假单胞菌胞内关键酶NapA和NapB表达量的可行性.选取多肽片段合成免疫抗原,并用其免疫兔子获得相应的多克隆抗体.ELISA检测第三次免疫后两周的兔抗血清的效价,并将最终免疫产生的抗体用于施氏假单胞菌样品的蛋白免疫印迹分析.制备的多肽抗原具有良好的免疫原性,NapB免疫原效果甚佳,血清效价大于1:160000,NapA的效价也可达到1:14000.免疫印迹试验结果的发光图像中内参条带清晰整齐,在目标蛋白条带区域也可以看到明显反应带.本研究制备出的抗体可用于施氏假单胞菌胞内NapA和NapB蛋白的免疫印迹分析,后续还可以改变实验条件通过内参蛋白进行半定量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柴晓利	同济大学环境科学与工程学院	70	1301	18.0	34.0
2	周萌	同济大学环境科学与工程学院	6	85	4.0	6.0