柿果实CCD1基因超表达和RNAi表达载体的构建

• 作者: 卜庆忠 吴慧 周春华 葛博学 陈昕晟
• 来源期刊: 扬州大学学报（农业与生命科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 柿果实 香气 CCD1基因 超表达载体 RNAi表达载体
• 年，卷（期）: 2019,（1）
• 页码范围: 97-102
• 页数: 6页
• 分类号: S663.9
• 语种: 中文
• DOI: 10.16872/j.cnki.1671-4652.2019.01.017

摘要

采用CTAB法提取小方柿果肉总RNA,根据带有不同酶切位点的引物获得目的基因柿类胡萝卜素裂解双加氧酶基因(DkCCD1),将扩增的目的基因序列与NCBI登录的基因序列进行核苷酸序列和氨基酸序列比对,发现核苷酸序列相似度均超过99％,氨基酸序列相似度均为100％,由此得到可用于后续试验的目的基因.将得到的目的基因与双元表达载体pCAMBIA1301连接,构建pCAMBIA1301-CCD1超表达载体和具有发卡结构的pCAMBIA1301-CCD1-RNAi表达载体,通过冻融法将载体导入农杆菌EHA105.PCR扩增结果表明:所构建的pCAMBIA1301-CCD1超表达载体和pCAMBIA1301-CCD1-RNAi载体已导入农杆菌,可用于后续的遗传转化研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周春华		34	646	14.0	25.0
2	吴慧		11	34	4.0	5.0
3	陈昕晟		3	3	1.0	1.0
4	卜庆忠		3	4	1.0	2.0
5	葛博学		2	3	1.0	1.0