幽门螺杆菌virD4基因的克隆表达及其功能初探

• 作者: 孟红霞 朱虹 杨洋 栾瑄 樊书 邵世和
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 virD4 tfs3编码Ⅳ型分泌系统 原核表达 重组蛋白质
• 年，卷（期）: 2019,（7）
• 所属期刊栏目: 研究生园地
• 页码范围: 539-545
• 页数: 7页
• 分类号: R446.5|R378.3
• 字数: 6619字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2019.07.15

摘要

目的 研究幽门螺杆菌SBK临床分离株virD4的功能.方法 通过T-A克隆获得virD4基因片段;构建pET-28a(+)-virD4原核表达载体,转化入Rosetta工程菌,IPTG诱导表达;KCl染色切胶纯化法获得重组蛋白质,SDS-PAGE法分析鉴定重组蛋白质;纯化的重组蛋白质免疫小鼠,获得多克隆抗体,ELISA法检测效价,western blot法分析抗原反应特异性;重组蛋白质与GES-1细胞共培养,检测其对细胞炎症因子的表达及细胞增殖的影响.结果 virD4基因全长为1728 bp,序列与Shi470菌株的virD4基因同源性较高;成功构建原核表达载体,经诱导及纯化获得相对分子质量为63000的重组蛋白质;成功免疫小鼠制备多克隆抗体,效价为512000,抗原抗体反应具有特异性;virD4能诱导GES-1细胞分泌炎症因子和增殖.结论 成功克隆并表达virD4基因,制备多克隆抗体,其重组蛋白质能诱导细胞因子分泌及细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邵世和	江苏大学医学院江苏省检验医学重点实验室	99	382	9.0	14.0
3	杨洋	江苏大学医学院江苏省检验医学重点实验室	12	68	4.0	8.0
4	朱虹	江苏大学医学院江苏省检验医学重点实验室	7	18	2.0	4.0
5	孟红霞	上海市东方医院巴里马歇尔消化疾病诊疗中心	2	1	1.0	1.0
6	樊书	江苏大学医学院江苏省检验医学重点实验室	1	0	0.0	0.0
7	栾瑄	江苏大学医学院江苏省检验医学重点实验室	1	0	0.0	0.0