CRISPR/Cas9介导的LATS1/2敲除抑制卵巢癌细胞ES-2增殖

• 作者: 刘胜兵 杨柳青 林仙德 潘巍巍 王卓文 胡汉寅 胡灵灵 钱若文轩 陈子彦
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 大肿瘤抑制基因1/2(LAST 1/2) 卵巢癌 细胞增殖 凋亡
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 565-574
• 页数: 10页
• 分类号: R373.39
• 语种: 中文
• DOI: 10.13865/j.cnki.cjbmb.2019.05.14

摘要

Hippo信号通路在哺乳动物肝脏发育、动态平衡、再生和疾病中发挥非常重要的作用.大肿瘤抑制基因1/2(large tumor suppressor 1/2,LATS1/2)激酶是Hippo信号通路的关键激酶,可以磷酸化YES相关蛋白(yes-associated protein,YAP),从而调节YAP的核质定位和降解.本文采用CRISPR/Cas9方法构建慢病毒介导的Last 1/2基因敲除的载体,通过包装、感染和嘌呤霉素筛选,获得LATS1/2部分敲除的人卵巢癌ES-2和H08910细胞,免疫印迹方法检测LATS1/2表达明显减少.细胞增殖实验检测LATS1/2缺失明显抑制ES-2和HO8910细胞增殖.软琼脂克隆形成实验表明,LATS1/2缺失抑制卵巢癌ES-2细胞的克隆形成能力.细胞划痕和Transwell实验证明,LATS1/2缺失明显抑制卵巢癌ES-2细胞迁移.流式细胞检测发现,LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞凋亡并影响细胞周期.裸鼠成瘤实验表明,LATS1/2缺失明显抑制体内肿瘤组织增殖.分子机制研究表明,LATS1/2敲除促进卵巢癌ES-2细胞中胶原Ⅰ型α1(collagen type Ⅰ α1,ColⅠα1)基因表达量增加,在卵巢癌ES-2细胞中同时敲除LATS1/2和COL1A1,可以促进细胞克隆形成.综上结果,人卵巢癌ES-2细胞中LATS1/2缺失能促进COL1A1表达增加,从而抑制细胞增殖、转移和克隆形成,并影响细胞周期和促进细胞凋亡.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘胜兵		23	53	4.0	6.0
2	潘巍巍		17	43	4.0	6.0
3	陈子彦		4	3	1.0	1.0
4	林仙德		1	0	0.0	0.0
5	胡灵灵		2	0	0.0	0.0
6	胡汉寅		2	0	0.0	0.0
7	杨柳青		2	0	0.0	0.0
8	王卓文		1	0	0.0	0.0
9	钱若文轩		2	0	0.0	0.0