人LncRNA MIR31HG基因稳定转染PC9细胞系的构建及其对细胞增殖和迁移的影响

• 作者: 代娟娟 席思川 李晨 杜静 杨丽娟 武艳 苗双
• 来源期刊: 吉林大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 长链非编码RNA MIR31HG PC9细胞 细胞增殖 细胞迁移
• 年，卷（期）: 2019,（4）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 801-806
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 4524字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13481/j.1671-587x.20190410

摘要

目的:检测过表达人MIR31HG基因对PC9细胞增殖和迁移的影响,阐明促癌基因MIR31HG的作用机制.方法:通过RT-PCR法扩增长链非编码RNA(LncRNA)MIR31HG全长序列,分子克隆至pcDNA3.1(―)真核表达载体,将pcDNA3.1-MIR31HG过表达质粒和对照质粒pcDNA3.1分别转染人肺癌PC9细胞.采用酶切鉴定法检测MIR31HG过表达载体的构建情况.通过G418药物筛选建立稳定过表达MIR31HG的PC9细胞系(PC9-pcDNA3.1-MIR31HG,稳定转染组)和对照细胞系(PC9-pcDNA3.1,空载体组).采用RT-PCR法检测稳定转染细胞系中MIR31HG基因表达水平,采用CCK-8法和划痕愈合实验检测PC9细胞增殖活性和迁移能力.结果:琼脂糖凝胶电泳,成功扩增得到了MIR31HG的特异基因片段;MIR31HG真核表达载体经双酶切后分别产生目的基因和载体2个片段.RT-PCR法检测,稳定转染组细胞中MIR31HG mRNA表达水平明显高于空载体组(P<0.05).CCK-8检测,在培养24、36和48 h时,稳定转染组细胞增殖活性明显高于空载体组(P<0.01).划痕愈合实验,在培养48 h时,稳定转染组细胞划痕愈合率明显高于空载体组(P<0.05).结论:成功构建了人LncRNA MIR31HG基因的真核过表达载体和过表达MIR31HG的稳定转染PC9细胞系,且MIR31HG过表达能够促进肺癌PC9细胞增殖和迁移.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	武艳	滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室	6	3	1.0	1.0
2	代娟娟	滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室	8	4	1.0	1.0
3	杨丽娟	滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室	36	120	6.0	9.0
4	杜静	滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室	6	5	1.0	2.0
5	苗双	滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室	8	19	2.0	4.0
6	席思川	滨州医学院附属医院肿瘤研究实验室	2	1	1.0	1.0
7	李晨	滨州医学院附属医院代谢与神经精神疾病研究所	3	0	0.0	0.0