兔出血症病毒次要衣壳蛋白VP12在大肠杆菌体内高效表达及特性研究

• 作者: 于新友 于雪 刘吉山 李书光 杨慧 沈志强 王艳 肖跃强
• 来源期刊: 家畜生态学报
• 学科: 农学
• 关键词: 兔出血症病毒 次要衣壳蛋白 原核表达 活性研究 抗体
• 年，卷（期）: 2019,（8）
• 所属期刊栏目: 科学研究
• 页码范围: 27-32
• 页数: 6页
• 分类号: S811.5
• 字数: 4340字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-1182.2019.08.005

摘要

试验旨在通过原核高效表达RHDV VP12蛋白,检测同源组织疫苗免疫后该蛋白抗体的产生情况.RT-PCR扩增获得抗原遗传变异株SQ-1株兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)次要衣壳蛋白VP12基因,定向克隆插入pET32a多克隆位点,构建Trx-His tag融合原核表达载体,PCR与序列测定正确后转化大肠杆菌Rosetta (DE3)感受态细胞,IPTG诱导表达,Western blot鉴定分析表达产物活性.测序结果显示,所扩增VP 12基因ORF(开放阅读框)为354 bp,编码117个氨基酸,IPTG诱导后目的基因获得表达,融合栽体Trx-His tag的重组VP12蛋白分子量为31 ku,与预期一致,且表达蛋白存在可溶性与包涵体两种形式;Western blot结果显示,可溶性表达蛋白与兔瘟肝组织灭活疫苗免疫后攻毒制备的RHDV阳性抗体能发生良好的抗原抗体杂交反应,说明该蛋白具有良好的反应原性.研究结果为开展RHDV VP12蛋白生物学与免疫学特性研究、开发诊断试剂奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李书光		34	76	5.0	6.0
2	刘吉山		106	274	8.0	13.0
3	沈志强		525	1950	18.0	25.0
7	王艳		91	232	7.0	9.0
8	于新友		198	275	6.0	8.0
9	杨慧		16	66	5.0	7.0
10	于雪		6	8	1.0	2.0