猪环鸟苷酸-腺苷酸合成酶cGAS基因的原核表达及其表达产物的生物活性分析

• 作者: 何小兵 房永祥 景志忠 王国蒨 贾怀杰 陈国华 龙朝琳
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: cGAS 2'3'-cGAMP 原核表达 纯化 活性分析
• 年，卷（期）: 2019,（10）
• 所属期刊栏目: 基础兽医学
• 页码范围: 1324-1330
• 页数: 7页
• 分类号: S852.4
• 语种: 中文
• DOI: 10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0161

摘要

为获得具有生物学活性的环鸟苷酸-腺苷酸合成酶(cyclic GMP-AMP synthase,cGAS)蛋白与第二信使分子2'3'-cGAMP,构建了猪源cGAMP合成酶pcGAS基因的原核表达载体pET-28a-SUMO-pcGAS,将其转化至大肠杆菌Rosetta(DE3),并通过优化诱导条件实现了可溶性表达;利用镍柱亲和层析对表达的重组蛋白产物进行初步纯化,随后切除SUMO标签蛋白,再用亲和层析进一步纯化,获得了纯度较高的重组蛋白pcGAS;将获得的重组蛋白pcGAS通过体外酶促反应生物合成了2'3'-cGAMP,且合成产物能够诱导启动细胞Ⅰ型IFNs的产生.结果 表明,pcGAS重组蛋白和2'3'-cGAMP均具有生物活性,这为后续抗病毒、抗肿瘤药物以及免疫增强剂的开发奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	景志忠	中国农业科学院兰州兽医研究所	81	458	12.0	18.0
2	陈国华	中国农业科学院兰州兽医研究所	50	267	10.0	12.0
3	何小兵	中国农业科学院兰州兽医研究所	14	18	2.0	4.0
4	贾怀杰	中国农业科学院兰州兽医研究所	19	19	2.0	4.0
5	房永祥	中国农业科学院兰州兽医研究所	12	0	0.0	0.0
6	龙朝琳	中国农业科学院兰州兽医研究所	1	0	0.0	0.0
7	王国蒨	中国农业科学院兰州兽医研究所	3	0	0.0	0.0