北京棒杆菌天冬氨酸激酶 M372 I‐T379S双突变体的构建及其酶学性质

• 作者: 方丽 詹冬玲 闵伟红 韩彩静 高云娜
• 来源期刊: 吉林大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 天冬氨酸激酶 定点突变 酶动力学 酶学性质
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 1267-1274
• 页数: 8页
• 分类号: Q78
• 字数: 2941字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13413/j.cnki.jdxblxb.2018448

摘要

为构建高酶活力天冬氨酸激酶(aspartokinase ,A K ) ,并削弱或解除Lys(lysine)反馈抑制作用突变体,通过定点突变和高通量筛选技术构建突变体M 372I ,T379S和M372I‐T379S ,对野生型(W T )和突变体分别进行诱导表达、纯化及酶学性质表征 .结果表明:突变体M372I ,T379S 和M372I‐T379S AK 与 W T A K 相比,V max分别提高了13 .77 ,15 .02 ,15 .60倍,Km 和 n值均降低;最适pH值分别升高为8 .0,8 .5,8 .5,且半衰期分别延长了1 .0,0 .9, 2 .3 h ;M372I‐T379S AK最适温度为30 ℃,比W T A K高2 ℃;当浓度为1～10 m mol／L时,突变体均削弱或部分解除了抑制剂Lys的反馈抑制作用 .

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闵伟红	吉林农业大学食品科学与工程学院	113	614	13.0	20.0
2	方丽	吉林农业大学食品科学与工程学院	28	85	5.0	8.0
3	詹冬玲	吉林农业大学食品科学与工程学院	40	122	6.0	9.0
4	韩彩静	吉林农业大学食品科学与工程学院	6	38	3.0	6.0
5	高云娜	吉林农业大学食品科学与工程学院	1	0	0.0	0.0