黏虫溶菌酶基因Mswly的克隆与真核表达

• 作者: 张元臣 张国强 王景顺 董丽丽 蔡新
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 黏虫 溶菌酶 基因克隆 RACE 系统发育 真核表达
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 70-77
• 页数: 8页
• 分类号: S433.4
• 字数: 5894字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2019.05.011

摘要

为了研究溶菌酶在害虫抵抗虫生真菌中的作用及分子机制,以黏虫为试验材料,利用RT-PCR和RACE技术获得黏虫溶菌酶基因Mswly的全长序列,同时采用体外真核表达系统对Mswly基因进行蛋白质表达.克隆、测序后分析表明,Mswly基因的cDNA全长为652 bp(GenBank登录号为MG692501),开放阅读框序列长度为426 bp,编码141个氨基酸.其编码蛋白质分子质量为16.26 ku,理论等电点为6.57;含有信号肽,剪切位点在第20个和21个氨基酸之间;含有溶菌酶活性所需要的谷氨酸和天冬氨酸活性位点.系统进化树分析表明,Mswly与其他物种的C型溶菌酶聚集在一起,说明Mswly为C型溶菌酶.Western blotting结果显示,Mswly重组蛋白大小约17 ku,与预期分子质量大小一致,说明Mswly基因在昆虫Sf9细胞系能够高效表达.综上,从黏虫脂肪体中克隆得到了1个C型溶菌酶基因Mswly的完整cDNA序列,并将其在草地贪夜蛾细胞系Sf9中进行了高效表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王景顺		62	176	8.0	10.0
2	张国强		21	76	4.0	8.0
3	张元臣		6	6	2.0	2.0
4	蔡新		4	0	0.0	0.0
5	董丽丽		1	0	0.0	0.0