柚叶总黄酮对LPS所致Caco-2结肠上皮细胞间高通透性的保护作用

• 作者: 吴华 宋家乐 曾榛 王程强 钱波 高扬
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 柚叶总黄酮 脂多糖 肠上皮 屏障完整性 Caco-2细胞
• 年，卷（期）: 2019,（2）
• 所属期刊栏目: 营养与保健
• 页码范围: 287-292,299
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.4
• 字数: 5670字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.02.050

摘要

探讨柚叶总黄酮(PLTFE)对脂多糖(LPS,2μg/mL)诱发Caco-2高通透性细胞模型的保护作用.Caco-2模型细胞以不同浓度的PLTFE(0、10、50、100、150 μg/mL)处理培养24h进行后续实验.MTT法测定细胞生存率,细胞乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平依说明书使用试剂盒测定.酶联法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定白介素(interlukin-1β,IL-1β)、IL-8和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)分泌水平.跨上皮细胞电阻(trans epithelial electrical resistance,TEER)值和异硫氰酸荧光素-右旋糖酐(FD40)透过度用于评估细胞通透性水平.实时定量PCR(Quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测细胞IL-1β、IL-8、TNF-α、闭锁蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(claudin-1)、封闭小带蛋白(ZO-1)和肌球蛋白轻链激酶(myosin light chain kinase,MLCK)的mRNA表达.结果 表明,柚叶总黄酮能显著提高受损细胞生存率至86.1％,抑制受损细胞中LDH的溢出(p＜0.05).同时还能有效抑制受损细胞中炎性细胞因子(IL-1β、IL-8、TNF-α)的分泌及mRNA转录.此外,柚叶总黄酮可增强细胞紧密连接因子(Occludin、claudin-1、ZO-1)的mRNA转录,抑制MLCK的mRNA转录,改善细胞间高通透性qRT-PCR法检测细胞中相关因子的mRNA转录水平.结果 提示,柚叶总黄酮具有较强的抗炎活性,能通过上调细胞内细胞紧密连接相关因子的mRNA转录显著改善LPS造成的Caco-2细胞间高通透性的发生(p＜0.05).