羊传染性脓疱病毒122蛋白的原核表达纯化及多克隆抗体的制备

• 作者: 关继羽 刘芳 周帅帅 周艳龙 张竞 贺文琦 赵魁 高丰 高宇
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 羊传染性脓疱病毒 原核表达 蛋白纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 541-546
• 页数: 6页
• 分类号: S852.65
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2020.03.16

摘要

以提取的羊传染性脓疱病毒(ORFV)基因组为模版,PCR扩增ORFV122基因,并将该基因连接至原核表达载体pET-28a上,构建出pET-28a-122重组表达质粒.然后将该重组质粒转化至大肠杆菌BL21 (DE3)感受态,经IPTG诱导后成功表达出ORFV122蛋白.利用His标签可与镍离子结合的特性对ORFV122蛋白进行分离纯化.将纯化后的ORFV122蛋白免疫BALB/c小鼠,制备相应的多克隆抗体,并利用Western blot技术检测该抗体的特异性.免疫小鼠获得的抗ORFV122蛋白多克隆抗体经ELISA检测,其效价约为1∶80 000.此外,使用该抗体对ORFV122蛋白的表达规律进行了研究,发现ORFV122蛋白为早期表达蛋白.本试验获得的ORFV122蛋白多克隆抗体为以后ORFV122基因功能的后续研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	高宇	吉林大学动物医学学院	56	280	11.0	13.0
2	刘芳	吉林大学动物医学学院	64	356	9.0	17.0
3	赵魁	吉林大学动物医学学院	33	77	5.0	7.0
4	高丰	吉林大学动物医学学院	88	276	9.0	12.0
5	周帅帅	吉林大学动物医学学院	2	1	1.0	1.0
6	关继羽	吉林大学动物医学学院	4	1	1.0	1.0
7	张竞	吉林大学动物医学学院	9	11	2.0	2.0
8	周艳龙	吉林大学动物医学学院	4	7	2.0	2.0