鲤鱼重组IL-17N的原核表达条件优化及蛋白纯化

• 作者: 俞菊华 唐永凯 张磊 徐逾鑫 李红霞 李迎宾
• 来源期刊: 湖南农业大学学报（自然科学版）
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤鱼 白细胞介素17N 原核表达 重组蛋白 融合标签 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2020,（3）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医·水产
• 页码范围: 364-369
• 页数: 6页
• 分类号: S917.4
• 字数: 3065字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13331/j.cnki.jhau.2020.03.017

摘要

为获得可溶的鲤鱼IL-17N重组蛋白,构建原核重组表达质粒GST-17N、SUMO-GST-17N和MBP-17N,确定IL-17N的最适促溶标签,并优化其诱导表达条件(诱导剂异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)的浓度、诱导时间和诱导温度).结果:成功构建了鲤鱼IL-17N原核重组表达载体GST-17N、SUMO-GST-17N和MBP-17N;融合标签MBP、SUMO-GST和GST的促溶效果依次降低,SUMO-GST-17N、MBP-17N上清蛋白占总蛋白比例分别为47.4％、87.0％;MBP-17N的最佳表达条件为0.5 mmol/L IPTG,25℃诱导8～12 h;经过镍柱纯化,获得可溶MBP-17N蛋白,每克总菌约获得0.09 mg MBP-17N蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	唐永凯	南京农业大学无锡渔业学院	28	459	11.0	21.0
3	俞菊华	南京农业大学无锡渔业学院	38	655	17.0	24.0
5	张磊	南京农业大学无锡渔业学院	48	529	13.0	21.0
6	李红霞	南京农业大学无锡渔业学院	16	369	9.0	16.0
14	徐逾鑫	南京农业大学无锡渔业学院	1	0	0.0	0.0
15	李迎宾	南京农业大学无锡渔业学院	1	0	0.0	0.0