稳定过表达CXCR2受体的HEK-293细胞株的构建以及活性鉴定

• 作者: 任广明 尹荣华 张洁 杨晓明 葛志强 詹轶群 马文兵
• 来源期刊: 中国细胞生物学学报
• 关键词: CXCR2 慢病毒 HEK-293细胞 中性粒细胞 趋化性 F-actin
• 年，卷（期）: 2020,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1325-1331
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.11844/cjcb.2020.08.0003

摘要

CXC趋化因子受体2(the CXC chemokine receptor 2,CXCR2)介导的中性粒细胞趋化在细菌感染、慢性炎症、肿瘤发生发展过程中发挥着至关重要的作用,但是目前对于CXCR2受体及下游信号的调控并未被完全揭示.该研究首先以Flag-CXCR2-Tango质粒为模板设计Flag-CXCR2的特异性引物,PCR扩增后将其连接至pCDH-MCS-T2A-Neo-MSCV慢病毒表达载体上,随后对阳性克隆进行测序及表达验证.接着在HEK-293T细胞中包装过表达Flag-CXCR2的慢病毒颗粒并感染HEK-293细胞,使用遗传霉素筛选后,蛋白质免疫印迹和免疫荧光检测发现,Flag-CXCR2稳定表达在HEK-293细胞膜上.最后利用白细胞介素-8(interleukin-8,IL-8)刺激过表达Flag-CXCR2的细胞株,检测发现CXCR2下游信号通路活化及F-actin组装.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	葛志强		46	393	12.0	17.0
2	张洁		44	215	7.0	12.0
3	杨晓明		7	107	3.0	7.0
4	任广明		1	0	0.0	0.0
5	马文兵		1	0	0.0	0.0
6	詹轶群		1	0	0.0	0.0
7	尹荣华		1	0	0.0	0.0