lys1-d缺陷型标记介导毕赤酵母超高拷贝质粒整合

• 作者: 李画敏 邓明勇 魏子贡
• 来源期刊: 湖北大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 毕赤酵母 多拷贝质粒整合 缺陷型标记 荧光定量实时PCR
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 基因的克隆与表达研究专栏
• 页码范围: 471-475,483
• 页数: 6页
• 分类号: Q78
• 字数: 3130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-2375.2020.05.001

摘要

传统构建毕赤酵母质粒多拷贝菌株的方法不仅操作复杂、成本高,而且难以获得理想中的高拷贝菌株.近来,一种利用leu2-d缺陷型标记直接筛选毕赤酵母多拷贝克隆的方法显示出很大的便利.本研究发现,使用一个lys1-d缺陷型标记能更加高效地介导毕赤酵母超高拷贝质粒整合.首先构建一个携带lys1-d和EGFP(enhanced green fluorescent protein)报告基因的整合载体,然后将载体转化至敲除了内源lys1基因的毕赤酵母中,最后分别检测了转化子内EGFP含量和质粒拷贝数.结果显示,所有转化子整合的质粒拷贝数均处于19～168之间;并且转化子内质粒拷贝数越高,其胞内表达的EGFP产量也越高.这一系统为构建毕赤酵母超高拷贝质粒整合菌株增添了有效的工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓明勇	湖北大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
2	李画敏	湖北大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
3	魏子贡	湖北大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0