突变型NDUFS7质粒的构建及其对神经细胞的影响

• 作者: 查倩 沈杰 陈松 高向东
• 来源期刊: 中国药科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: NDUFS7 多巴胺能神经元 细胞凋亡 线粒体膜电位
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 论文
• 页码范围: 599-606
• 页数: 8页
• 分类号: Q78|Q421
• 语种: 中文
• DOI: 10.11665/j.issn.1000-5048.20200512

摘要

为了研究NDUFS7基因突变对神经元的影响,通过构建pcDNA3.1(+)-NDUFS7 Q208STOP突变质粒,并将其转入分化后SH-SY5Y细胞.采用MTT法检测转染突变质粒对多巴胺能神经细胞活力的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI双染结合流式细胞术检测转染突变质粒对细胞凋亡情况的影响;Western blot法检测转染突变质粒后细胞内凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达水平的变化;采用JC-1探针检测转染突变质粒对分化后SH-SY5Y细胞内线粒体膜电位的影响及抗氧化剂Trolox的干预作用;最后PI/Hoechst双染检测Trolox对转染突变质粒的分化后SH-SY5Y细胞凋亡情况的干预作用.结果显示,多巴胺能神经细胞内线粒体复合体Ⅰ亚基突变能够导致神经细胞活力下降,凋亡增多,而抗氧化剂能够缓解转染突变质粒导致的线粒体膜电位异常和细胞凋亡,提示转染NDUFS7基因突变质粒能通过引起多巴胺能神经细胞内线粒体功能异常从而导致细胞凋亡.