野生型和突变型人白介素13哺乳细胞表达质粒的构建1

• 作者: 储毅 刘全华 华丽 朱亚菊 高苗苗 鲍一笑
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 人白介素13 表达质粒 构建 哺乳细胞
• 年，卷（期）: 2011,（11）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 966-969
• 分类号: R392.12
• 字数: 3819字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2011.11.002

摘要

目的:构建野生型及突变型人IL-13(hIL-13)哺乳细胞表达质粒.方法:采用融合PCR扩增人生长激素(hGH)-hIL13融合蛋白编码序列.PCR产物和pcDNA3.1表达载体经Hind Ⅲ和EcoR Ⅰ双酶切处理后,将PCR产物定向插入pcDNA3.1真核表达载体中,构建质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g.将其转化到DH5α感受态细胞内进行扩增,阳性克隆鉴定,质粒抽提,进行测序验证.结果:重组质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g经测序验证,hGH-hIL13融合蛋白编码序列与实验设计一致,且已与pcDNA3.1(+)真核表达载体正确重组.结论:成功构建了哺乳细胞表达质粒pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-a和pcDNA3.1(+)/hGH-hIL13-g,为后续野生型及突变型hIL-13哺乳细胞的重组表达奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	鲍一笑	上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科	61	470	12.0	20.0
2	华丽	上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科	33	168	8.0	11.0
3	刘全华	上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科	9	87	4.0	9.0
4	朱亚菊	上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科	8	45	3.0	6.0
5	高苗苗	上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科	10	48	2.0	6.0
6	储毅	上海交通大学医学院附属新华医院儿童呼吸科	2	0	0.0	0.0