塞尼卡谷病毒3ABC蛋白的表达、纯化及多克隆抗体制备

• 作者: 周玲玲 宋玉伟 张慢 张明亮 林正丹 王英杰 连凯琪
• 来源期刊: 河南农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 塞尼卡谷病毒 3ABC蛋白 原核表达 蛋白质纯化 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2020,（1）
• 所属期刊栏目: 畜牧·兽医
• 页码范围: 123-127
• 页数: 5页
• 分类号: S855.3
• 字数: 3568字
• 语种: 中文
• DOI: 10.15933/j.cnki.1004-3268.2020.01.017

摘要

为了开发塞尼卡谷病毒(Seneca Valley virus,SVV)的检测试剂盒,克隆3ABC基因进行原核表达和纯化,并将纯化的3ABC蛋白免疫大鼠,制备抗3ABC蛋白的多克隆抗体.通过Western blot鉴定制备的多克隆抗体与表达的3ABC蛋白的特异性识别能力,通过ELISA测定多克隆抗体的效价.结果 显示,3ABC基因在大肠杆菌中大量表达,且主要以包涵体形式表达,重组蛋白分子质量约为55 ku,经纯化后得到单一条带.免疫大鼠制备的多克隆抗体效价大于1∶64 000,且与表达的3ABC重组蛋白发生特异性反应.综上,在大肠杆菌中成功表达了SVV 3ABC蛋白,且表达的重组蛋白具有免疫原性.