共表达HAC1和分子伴侣基因对甘露聚糖酶在毕赤酵母中表达的影响

• 作者: 姚银 张华山 张莉 熊海容 闵琪 高子涵
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 甘露聚糖酶 毕赤酵母 HAC1基因 分子伴侣 蛋白表达
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 159-168
• 页数: 10页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2019-0718

摘要

为了提高甘露聚糖酶ManA在毕赤酵母中分泌表达的酶活,选择毕赤酵母内质网未折叠蛋白反应(Unfolded protein response,UPR)激活调控因子HAC1与5种毕赤酵母蛋白折叠相关的分子伴侣ERO1、PDI、PDI1、CPR5、BiP,通过构建pPICZA-HAC1等6种胞内表达重组质粒,分别电转化至分泌表达ManA的毕赤酵母重组菌中胞内共表达,并分析其重组菌摇瓶发酵时ManA表达的影响.结果发现在摇瓶发酵水平,胞内共表达HAC1、ERO1、PDI的重组菌发酵上清液中的ManA酶活力分别提高了26％、15％、20％,其重组菌发酵上清液的酶活力分别达到1014 U/mL、925 U/mL、965 U/mL.通过对各重组菌上清液酶活力、胞内滞留酶活力、上清液蛋白浓度数据进行分析,进一步选择将HAC1、ERO1、PDI进行两基因或三基因组合,并分别在分泌表达ManA的重组菌胞内共表达,但各共表达重组菌发酵上清液的酶活力都没有进一步的提升.单独共表达HAC1或者分子伴侣ERO1、PDI可以辅助ManA的正确折叠,提高其蛋白表达.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张华山	湖北工业大学发酵工程省部共建教育部重点实验室	41	203	8.0	12.0
2	熊海容	中南民族大学生命科学学院	37	114	6.0	8.0
3	张莉	中南民族大学生命科学学院	17	53	3.0	6.0
4	闵琪	中南民族大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
5	高子涵	中南民族大学生命科学学院	2	1	1.0	1.0
6	姚银	中南民族大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0