结核分枝杆菌Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6融合基因DNA疫苗株的构建及免疫原性研究

• 作者: 包金风 张真 杨鹏辉 王希良 申梦 赵玲娜
• 来源期刊: 免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: DNA疫苗 Ag85B ESAT6 Hsp65 分枝杆菌
• 年，卷（期）: 2020,（2）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 109-115
• 页数: 7页
• 分类号: R392.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13431/j.cnki.immunol.j.20200019

摘要

目的 构建结核分枝杆菌Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA候选疫苗株并鉴定,初步评价其免疫原性.方法 从GenBank中获取M.tuberculosis H37Rv的Ag85B、ESAT6和Hsp65基因序列优化后合成,经PCR、酶切、连接与真核表达载体PVAX1重组,构建重组质粒PVAX1-Hsp65-Ag85B和PVAX1-Hsp65-ESAT6.重组质粒体外转染验证其表达后,免疫C57BI/6小鼠,检测特异性细胞免疫应答反应.结果 Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA疫苗株在体内外均能表达,Western blot结果显示,DNA疫苗株体外转染293T细胞,24 h可检测到特异性蛋白条带,48 h蛋白表达量达最高.小鼠体内实验表明,Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA疫苗株均可激发较强的免疫反应,可诱导机体产生分泌高水平TNF-α的Th型免疫应答,且Hsp65-Ag85B优于Hsp65-ESAT6.结论 Hsp65-Ag85B、Hsp65-ESAT6 DNA疫苗株均具有较强的免疫原性,呈Th型细胞介导的免疫应答,推测Hsp65-Ag85B DNA疫苗的保护效力优于Hsp65-ESAT6,为新型结核DNA疫苗研制提供了实验依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	包金风		19	32	4.0	4.0
2	张真		3	3	1.0	1.0
3	赵玲娜		1	0	0.0	0.0
4	申梦		1	0	0.0	0.0
5	王希良		1	0	0.0	0.0
6	杨鹏辉		1	0	0.0	0.0