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一种新型靶向Frizzled7抗体的筛选及其人源化设计
一种新型靶向Frizzled7抗体的筛选及其人源化设计
作者:
徐艳婕
曹宇
柴彬淑
潘维
王进
王逸云
解伟
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
Frizzled7
抗体人源化
抗肿瘤
亲和力
摘要:
目的:获得一种新型靶向人Frizzled7(Fzd7)蛋白的人源化抗体.方法:首先用重组人Fzd7蛋白(rhFzd7)免疫BALB/c小鼠,获得鼠源抗Fzd7抗体(SHH002),并用生物膜层干涉技术(biolayer interferometry,BLI)检测SHH002的亲和力;测序获得SHH002可变区序列(V区),通过与Human Germline序列库比对选择人源化设计模板,利用Discoverystudio软件对SHH002进行人源化设计,获得人源化抗Fzd7抗体SHH002-hu,并对SHHO02-hu的纯度和亲和力进行验证,最后通过MTT实验初步验证其抗肿瘤活性.结果:杂交瘤筛选技术获得高亲和力(亲和力常数KD<1.0×10-12 mol·L-1)鼠源抗Fzd7抗体SHH002;SHH002 V区序列比对Human Germline序列库,选择同源性最高的IGHV1/IGKV1作为人源化设计模板,保留对抗体结构稳定性起关键作用的鼠源氨基酸,将非关键的位点突变为人源氨基酸,获得人源化程度高达98%的人源化抗体SHHO02-hu;分子排阻色谱(SEC-HPLC)检测其纯度>95%,BLI法验证其KD<1.0×10-12 mol·L-1,MTT实验表明SHHO02-hu可有效抑制三阴性乳腺癌(triple-negative breast cancer,TNBC)细胞的体外增殖.结论:本实验获得了高度人源化且高亲和力的靶向Fzd7抗体SHH002-hu,为多种恶性肿瘤提供一种全新的靶向治疗候选方案.
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文献信息
篇名
一种新型靶向Frizzled7抗体的筛选及其人源化设计
来源期刊
中国新药杂志
学科
医学
关键词
Frizzled7
抗体人源化
抗肿瘤
亲和力
年,卷(期)
2020,(11)
所属期刊栏目
实验研究
研究方向
页码范围
1276-1284
页数
9页
分类号
R965.1|R975.5
字数
5606字
语种
中文
DOI
五维指标
作者信息
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姓名
单位
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1
解伟
上海健康医学院药学院
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王进
上海健康医学院药学院
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上海健康医学院药学院
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柴彬淑
上海健康医学院药学院
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Frizzled7
抗体人源化
抗肿瘤
亲和力
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研究来源
研究分支
研究去脉
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期刊影响力
中国新药杂志
主办单位:
中国医药科技出版社
中国医药集团总公司
中国药学会
出版周期:
半月刊
ISSN:
1003-3734
CN:
11-2850/R
开本:
大16开
出版地:
北京市海淀区大钟寺东路太阳园11号楼2603室
邮发代号:
82-488
创刊时间:
1992
语种:
chi
出版文献量(篇)
11840
总下载数(次)
42
总被引数(次)
85958
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
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