虎奶菇Mn-SOD提取、鉴定及基因的克隆

• 作者: 杨加亮 田云恒 马爱民
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 虎奶菇 锰超氧化物歧化酶 酶活 同源克隆 融合引物与巢式PCR
• 年，卷（期）: 2020,（15）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 150-157
• 页数: 8页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 6515字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.15.024

摘要

以虎奶菇菌丝为材料,提取、鉴定了虎奶菇锰超氧化物歧化酶,克隆虎奶菇锰超氧化物歧化酶基因.用液氮研磨、超声、硫酸铵沉淀和透析等方法提取虎奶菇Mn-SOD;WST-8法测定虎奶菇Mn-SOD酶活力;H2O2鉴定虎奶菇SOD的类型;用同源克隆、cDNA末端快速扩增技术和融合引物与巢式PCR等方法从虎奶菇中克隆锰超氧化物歧化酶基因.结果 表明,虎奶菇Mn-SOD酶活力为1.66个酶活力单位.酶经过H2O2处理后仍然有活性,与未处理无明显差异,表明虎奶菇中SOD主要是Mn-SOD.克隆获得了虎奶菇锰超氧化物歧化酶基因PtMn-SOD,其DNA序列全长1025 bp,开放阅读框全长为663 bp,编码220个氨基酸.序列分析与系统进化树表明,PtMn-SOD与属于侧耳属的糙皮侧耳(登录号:MH645359.1)关系较近.预测该蛋白质分子量为24.54 kDa,蛋白等电点为7.86.PtMn-SOD蛋白定位于线粒体,在线粒体中发挥功效.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	马爱民	华中农业大学食品科学技术学院	54	391	11.0	16.0
2	杨加亮	华中农业大学食品科学技术学院	2	0	0.0	0.0
3	田云恒	华中农业大学食品科学技术学院	2	0	0.0	0.0