CP4-EPSPS蛋白抗体的制备及其夹心ELISA定量检测方法的建立

• 作者: 于寒松 候吉超 张春雨 李小宇 李忠鹏 王永志
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: CP4-EPSPS 酶联免疫吸附(ELISA) 大豆 抗体 检测
• 年，卷（期）: 2020,（14）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 69-74
• 页数: 6页
• 分类号: TS201.2
• 字数: 3890字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2020.14.012

摘要

为了快速高效地检测转Cp4 epsps基因抗除草剂大豆,本研究利用已制备的CP4-EPSPS蛋白免疫实验动物,获得5株CP4-EPSPS蛋白鼠单克隆抗体及3份羊抗血清,建立了CP4-EPSPS蛋白双抗夹心酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法,同时利用该方法对结荚期的Cp4 epsps转基因抗除草剂大豆的根、茎、叶、种子进行定量检测.结果 显示,最佳检测条件为捕获抗体1D12,工作浓度1.25 μg/mL,包被酶标板,4℃静置过夜,检测样品20℃孵育45 min,检测抗体8092,工作浓度2.5 μg/mL,20℃孵育30 min;CP4-EPSPS蛋白在模拟大豆环境中最低检测限为3.6 ng/mL,检测范围为7.5～125 ng/mL;重复性变异系数小于15％.利用上述检测条件,在转Cp4 epsps基因抗除草剂大豆的根、茎、叶、种子中均检测到CP4-EPSPS蛋白的表达,且各组织部位表达量差异显著,其中CP4-EPSPS蛋白在叶片中表达量最高,茎、种子、根中CP4-EPSPS蛋白表达量逐渐降低.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	于寒松	吉林农业大学食品科学与工程学院	89	334	9.0	14.0
2	王永志		9	8	1.0	2.0
3	候吉超	吉林农业大学食品科学与工程学院	1	0	0.0	0.0
7	李忠鹏		3	13	1.0	3.0
8	李小宇		3	0	0.0	0.0
9	张春雨		2	0	0.0	0.0