山羊地方性鼻内肿瘤病毒SU蛋白的表达及其多克隆抗体的制备和特性分析

• 作者: 江锦秀 张靖鹏 林裕胜 游伟 胡奇林
• 来源期刊: 福建农业学报
• 关键词: 山羊地方性鼻内肿瘤病毒 表面蛋白 原核表达 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2021,（2）
• 所属期刊栏目: 动物科学|Animal Science
• 页码范围: 135-140
• 页数: 6页
• 分类号: S855.3
• 语种: 中文
• DOI: 10.19303/j.issn.1008-0384.2021.02.001

摘要

[目的] 明确山羊地方性鼻内肿瘤病毒(ENTV-2)SU蛋白的功能.[方法] 采用RT-PCR方法从ENTV-2FJ分离株中扩增获得SU基因片段,将其克隆到Pmd-19T载体;测序验证后,再亚克隆到PET-32a(+)上,在RosettagamiB(DE3) 感受态细胞进行表达,采用SDS-PAGE 、Western-blot和ELISA对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析.[结果] 结果显示,表达的重组菌融合蛋白大小约64.38 Kd,在IPTG终浓度0.4 mmol·L-1、37 ℃诱导4 h表达效果最好.用纯化的ENTV-2进行SDS-PAGE,SU重组蛋白免疫小鼠制备的多克隆抗体作为一抗,进行Western-blot,结果显示鼠抗SU蛋白多克隆抗体能与ENTV-2抗原进行特异性的反应.[结论] 表达的SU蛋白有较好的抗原性,为制备ENTV-2特异性单克隆抗体及建立ENTV-2特异性血清学方法奠定了基础.