核酸外切酶Ⅲ辅助的DNA铽离子配合物时间分辨荧光检测黄曲霉毒素B1

• 作者: 柳苏月 田晶晶 朱龙佼 黄昆仑 田洪涛 许文涛
• 来源期刊: 分析化学
• 关键词: 核酸外切酶Ⅲ 时间分辨荧光分析技术 黄曲霉毒素B1 铽离子(Ⅲ)
• 年，卷（期）: 2021,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告|Scientific Papers
• 页码范围: 1327-1334
• 页数: 8页
• 语种: 中文
• DOI: 10.19756/j.issn.0253-3820.211168

摘要

基于适配体的高特异性识别能力,结合核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助的核酸信号放大策略和时间分辨荧光测量技术,构建了无标记、超灵敏的适配体荧光生物传感器(Aptasensor),用于检测黄曲霉毒素B1(AFB1).设计了两个无标记的功能核酸发夹,其中,含有AFB1适体序列的发卡H1作为识别元件,茎部含有富G序列的发卡H2作为信号响应元件.AFB1可特异性结合H1中的适配体序列,从而将H1打开,然后与H2互补配对形成AFB1-H1-H2复合物,继而触发ExoⅢ的酶切反应,对复合物中的H2的3′平末端进行消化切割,释放出H2中的富G序列,能够显著增敏铽离子(Tb3+)的发射.同时,释放出的AFB1-H1可以自由结合下一个H2,以启动ExoⅢ辅助的靶标循环扩增,引起体系中大量富G单链的释放,实现信号放大.随着AFB1浓度增加,体系相对荧光强度增大,可以通过时间分辨发光光谱实现对靶标AFB1的检测,线性检测范围为0.001～0.1 ng/mL,检出限(3σ)为0.9 pg/mL.采用本方法检测玉米样品中的AFB1,回收率在98.5％ ～103.5％之间,在食品和农产品检测方面具有良好的应用潜力.