用单个特异引物扩增桃ACC氧化酶cDNA及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 张上隆 张耀洲 金勇丰 陈大明
• 来源期刊: 应用与环境生物学报
• 学科: 农学
• 关键词: 桃(Prunuspersica) 单个特异引物 ACC氧化酶基因 克隆 表达
• 年，卷（期）: 1999,（1）
• 页码范围: 55-59
• 页数: 5页
• 分类号: S662.1
• 字数: 3623字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1006-687X.1999.01.012

摘要

用单个特异引物和通用引物oligo(dT)15从桃受伤叶片cDNA中扩增出1.3kb左右大小的片段.将该扩增产物克隆并对重组克隆作酶切分析发现至少可分为三类.用桃ACC氧化酶基因组DNA为探针进行点杂交表明,4,7,9,10,11,12重组质粒能与之杂交,其中7,9,10,11,12号重组质粒酶切图谱与已报导的桃果实成熟相关的ACC氧化酶cDNA基因基本一致,而4号克隆则不同.DNA序列分析和PCR鉴定表明,插入片段均由5'端特异引物单个引物扩增出来,对7号重组克隆插入片段DNA全序列分析表明,7号重组克隆插入片段全长1146 bp,包含了除启始密码子外的全部编码区和192 bp的3'端非编码区.通过补上起始密码子ATG构建重组表达载体,在大肠杆菌中表达出35×103的非融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张上隆	浙江农业大学园艺系	3	35	3.0	3.0
2	金勇丰	浙江农业大学园艺系	1	6	1.0	1.0
3	张耀洲	浙江农业大学生物化学研究所	1	6	1.0	1.0
4	陈大明	浙江农业大学园艺系	2	28	2.0	2.0