复合纤维素膜固定化胰蛋白酶反应器及其应用于蛋白质酶解

• 作者: 倪坚毅 姜泓海 张强 汪海林 邹汉法
• 来源期刊: 高等学校化学学报
• 学科: 化学
• 关键词: 复合纤维素膜 固定化胰蛋白酶 生物反应器 蛋白质降解 MALDI-TOF-MS
• 年，卷（期）: 2000,（5）
• 页码范围: 702-706
• 页数: 5页
• 分类号: O657.6
• 字数: 3759字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0251-0790.2000.05.008

摘要

合成了甲基丙烯酸缩水甘油酯-纤维素复合膜, 并以此膜为基质共价键合固定化胰蛋白酶, 以N-苯甲酰-L-精氨酰乙酯(BAEE)为底物, 应用高效液相色谱系统测定了酶固定化膜柱的催化反应特性. 研究结果表明: 温度、 pH值、离子强度、有机溶剂及蛋白变性剂等都对固定化酶的活力有一定的影响. 在最适条件下, 固定化胰蛋白酶的活力为17 800 U/g干膜, 蛋白载量为3.6 mg/g(≈0.15 μmol/g)干膜, 活性回收率达到52 %. 固定化酶表现出较高的使用和储藏稳定性, 在40 ℃下, 水解BAEE底物24 h活力无显著变化. 固定化酶膜柱在4 ℃冷藏保存100 d仍保存90%以上的水解活力. 固定化酶反应器被应用于蛋白质酶解的肽谱实验.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张强	中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心	194	3858	32.0	57.0
2	邹汉法	中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心	68	957	20.0	28.0
3	倪坚毅	中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心	17	266	9.0	16.0
4	汪海林	中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心	26	292	8.0	17.0
5	姜泓海	中国科学院大连化学物理研究所国家色谱研究分析中心	2	36	2.0	2.0