目的:重叠聚合酶链反应(Overlapping Polymerase Chain Reaction PC R)法是在上下游引物之间设计一对碱基互补的嵌套引物,第一轮PCR分别扩增5'端和3'端片段,第二轮PCR以第一轮PCR的5'端和3'端片段混和物为模板,用上下游引物扩增出全长片段.该文用逆转录-Overlapping PCR法快速高效地从前骨髓干细胞中扩增到人类PU.1全长 cD NA为442bp,酶切和测序证实完全与前人报道一致.构建的真核表达质粒pcDNA3.1-hPU.1可以被特异的抗体识别,体外细胞株转染证实具有特异的激活启动子活性的功能.