人Leptin的高效表达、纯化及生物学活性研究

• 作者: 刘金生 张捷 杨宏新 游力 王郡甫 田志刚 赵跃然
• 来源期刊: 医学研究通讯
• 学科: 医学
• 关键词: Leptin 基因表达 大肠杆菌 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2001,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 7-9
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2381字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-548X.2001.06.003

摘要

将人Leptin表达质粒pBV200-OB转化宿主菌E.coli JM109,热诱导获得目的蛋白的表达.经SDS-PAGE鉴定分析,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的40%以上,且以包涵体的形式表达.通过包涵体分离,Sephacryl S200HR凝胶和DEAE52离子交换层析及Hypersil C18柱反相色谱纯化,获得纯度在95%以上,内毒素含量小于10EU/Mg的高纯度的重组人Leptin.Western-blot鉴定表明,纯化表达产物能和抗Leptin抗体特异结合;蛋白质N端15个氨基酸序列分析结果和预期的序列一致.纯化产物经复性处理,其分子中Cys96和Cys146形成二硫键.体内活性检测显示,纯化和复性的rh-Leptin明显抑制BALB/c小鼠的进食和体重增长,提示其具有明显的生物学活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杨宏新		4	3	1.0	1.0