日本血吸虫原肌球蛋白编码基因克隆和表达

• 作者: 刘述先 曹建平
• 来源期刊: 中国寄生虫学与寄生虫病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫(大陆株) 原肌球蛋白 反转录 聚合酶链反应 分子克隆 核苷酸序列 表达
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 22-25
• 页数: 4页
• 分类号: R383.24
• 字数: 4555字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7423.2001.01.007

摘要

目的克隆和表达日本血吸虫大陆株原肌球蛋白(tropomyosin,TM)编码基因.方法应用RT-PCR方法体外扩增日本血吸虫原肌球蛋白编码基因,并采用T载体对该PCR产物直接进行克隆并用于核苷酸序列的测定.将目的基因亚克隆入原核表达载体pQE30,以IPTG诱导重组原肌球蛋白的表达.结果 PCR扩增产物约823bp,符合预计大小,并成功地克隆入T载体,对其中一克隆pGSjcTM12的插入片段的核苷酸序列分析表明,该序列和推测的氨基酸序列与曼氏血吸虫原肌球蛋白基因分别有91.1%和98.1%的同源性.该编码基因亚克隆入原核表达载体pQE30获得高效表达,分子量约32 kDa,并能被日本血吸虫天然原肌球蛋白免疫血清特异识别.结论日本血吸虫原肌球蛋白编码基因克隆和原核表达成功.