hBDNF基因原核表达重组质粒的构建及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 东云华 刘智敏 林佳 游乐然 王若菡 陈俊杰
• 来源期刊: 生物医学工程学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: hBDNF 基因克隆 SDS-PAGE 原核表达 Western杂交
• 年，卷（期）: 2001,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 68-71
• 页数: 4页
• 分类号: R394
• 字数: 2219字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1001-5515.2001.01.018

摘要

我们按照hBDNF基因全长编码序列设计合成引物，从人基因组DNA中扩增 出76 0bp的片段，反向插入到pGEM-3Zf（+）载体上，获得pGEMBF18克隆，限制性酶分析和DNA序 列测定均证实该克隆插入片段为hBDNF基因全长编码序列。从pGEMBF18克隆中获取hBDNF全长 编码片段，与原核表达载体pGEX-5T连接，构建了p5TBF34原核表达重组质粒。重组质粒转 化大肠杆菌JM109，经IPTG诱导表达，SDS-PAGE特异区带分子量为43kDa，此重组蛋白占菌 体可溶性蛋白总量的7.53%, Western杂交证实该特异区带具hBDNF抗原活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	东云华	华西医科大学生物化学与分子生物学研究所 重组DNA研究室	8	20	2.0	3.0
2	陈俊杰	华西医科大学生物化学与分子生物学研究所 重组DNA研究室	6	38	3.0	6.0
3	王若菡	华西医科大学生物化学与分子生物学研究所 重组DNA研究室	5	10	2.0	3.0
4	刘智敏		5	35	3.0	5.0
5	林佳	华西医科大学生物化学与分子生物学研究所 重组DNA研究室	2	6	2.0	2.0
6	游乐然	华西医科大学生物化学与分子生物学研究所 重组DNA研究室	2	6	2.0	2.0