重组原核表达质粒PTrc99A-ureB/hlyE 的构建和表达

• 作者: 朱森林 李国庆 焦志勇 胡品津 陈为 陈旻湖
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 幽门螺杆菌 ureB基因 hlyE基因 疫苗 重组
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 34-36,67
• 页数: 4页
• 分类号: R378.2
• 字数: 2646字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.03.008

摘要

目的构建表达幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)尿素酶B亚单位(ureB)基因与大肠杆菌K-12株hlyE基因融合表达的原核表达质粒pTrc99A-hlyE.并表达.方法用PCR扩增hlyE基因,经酶切连接反应将其克隆入重组原核表达质粒并测序,与GenBank中的核酸和蛋白序列进行BLAST分析,重组的阳性克隆经IPTG诱导培养,SE-PAGE电泳进行表达分析,薄层扫描分析融合蛋白的含量.结果对重组质粒进行酶切和PCR检测,证明构建了携带hlyE及ureB基因的重组原核表达质粒pTrc99A-ureB/hlyE,核酸序列测定及同源性分析证实所构建的原核表达质粒pTrc99A-ureB/hlyE中所含的Hp-ureB及hlyE与GeneBank中的Hp-ureB和hlyE序列的同源性分别为97.42%(1663/1707)、99%(910/918).重组细菌JM109可表达约100kD的融合蛋白ureB/hlyE,含量占全菌体蛋白含量的15.5%.结论构建并鉴定了原核表达质粒pTrc99A-hlyE并高效表达,为研究Hp口服疫苗奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈旻湖	中山大学第一附属医院消化内科	191	1602	20.0	28.0
2	胡品津	中山大学第一附属医院消化内科	145	1619	22.0	32.0
3	朱森林	中山大学第一附属医院消化内科	20	79	6.0	8.0
4	陈为	中山大学第一附属医院消化内科	22	258	8.0	15.0
5	焦志勇	中山大学第一附属医院消化内科	8	51	4.0	7.0
6	李国庆	中山大学第一附属医院消化内科	14	71	5.0	8.0