人脂皮素-1重组蛋白的表达与鉴定

• 作者: 李英丽 石丽萍 靳雁斌 颜光涛
• 来源期刊: 标记免疫分析与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 脂皮素-1 反转录聚合酶链反应 克隆 原核表达 聚丙烯酰胺凝胶电泳 免疫印迹分析
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 页码范围: 84-89
• 页数: 6页
• 分类号: R318
• 字数: 4237字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-1703.2001.02.010

摘要

为了获得有免疫原性的人脂皮素-1(lipocortin-1,LC-1)蛋白,以便疫动物获得抗体,建立了免疫分析方法,而且更深入地探讨LC-1抗炎机制及其在临床上的应用.采用基因工程的方法进行重组人LC-1的原核表达并鉴定,主要结果如下:(1)从U937细胞中提取总RNA,以此为模板行反转录PCR,成功地扩增了1038bp的人LC-1cDNA基因,并将此基因全长克隆入pUC18载体,经测序分析证实克隆序列与文献报道的序列基本一致;(2)成功地构建了原核表达质粒pBV220/LC-1,并在大肠杆菌中实现表达.经SDS-PAGE电泳和Western免疫印迹分析,证实重组菌产生37kD的表达产物,且此蛋白可与LC-1抗体特异结合.实现了人LC-1基因的克隆及原核表达,获得了有免疫学活性的LC-1,为LC-1的基础研究和临床应用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李英丽	解放军总医院基础所生化室	15	77	6.0	8.0
2	颜光涛	解放军总医院基础所生化室	148	624	12.0	15.0
3	石丽萍	解放军总医院基础所生化室	6	40	4.0	6.0
4	靳雁斌	解放军总医院基础所生化室	2	8	1.0	2.0