提高bFGF基因表达水平的策略及其表达产物的纯化工艺

• 作者: 刘雅娟 林剑 王莉馨 范洪学 金宁一
• 来源期刊: 中国肿瘤生物治疗杂志
• 学科: 医学
• 关键词: bFGF ATG SD 序列 表达 纯化
• 年，卷（期）: 2001,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 142-144
• 页数: 3页
• 分类号: R392.2
• 字数: 1196字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3872/j.issn.1007-385X.2001.02.017

摘要

目的： 通过在同一个表达载体pLX1上调整SD序列和ATG之间距离，以提高bFGF目的蛋白表达量。方法： 以Klenow和Mung Bean Nuclease通过增加2个及减少2个碱基调整SD序列和ATG之间距离，SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白表达量，以高压液相疏水层析、凝胶过滤及肝素亲和层析纯化目的蛋白、MTT法进行活性测定。结果： 获得了重组质粒pLX2，pLX3，诱导后与表达质粒pLX1（7.78%）相比，表达量分别为8.03%，9.9%，经纯化后获得的bFGF纯度达98%，ED50为2.29 ng/ml。结论： 调整SD序列和ATG之间距离可以增加目的基因的剂量,从而提高了目的基因在大肠杆菌中的表达水平。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范洪学	吉林大学预防医学院	57	328	11.0	15.0
2	金宁一	解放军军需大学病毒研究所	138	903	16.0	21.0
3	刘雅娟	吉林大学预防医学院	46	197	8.0	11.0
4	王莉馨	解放军军需大学病毒研究所	6	26	2.0	5.0
5	林剑	广州暨南大学生物工程研究所	1	1	1.0	1.0