猪干扰素γcDNA的分子克隆与在大肠杆菌中的表达

• 作者: 吴文学 夏春 汪明 蒋金书
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪 重组干扰素γ 表达
• 年，卷（期）: 2002,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 255-258
• 页数: 4页
• 分类号: S85
• 字数: 2863字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2002.03.011

摘要

采用RT-PCR技术从猪脾淋巴细胞总RNA中扩增出猪干扰素γcDNA(SwIFN-γ2).SwIFN-γ2与已报道的猪干扰素γ序列基本一致,仅在462位核苷酸处发生了点变异.在SwIFN-γ2成熟蛋白基因两端分别合成含SphⅠ和HindⅢ酶切位点的引物,用PCR扩增后亚克隆到pQE30表达载体,转化宿主菌SG13009(pREP4),经IPTG诱导表达了N'端含6个组氨酸的重组猪干扰素γ(6His-rSwIFNγ2).重组干扰素的表达量占总菌体蛋白的33.5%.采用Ni-NTA金属螯合亲和层析纯化6His-rSwIFNγ2,其纯度达90%以上,经8 mol/L尿素溶液变性、透析复性后,其抗滤泡性口炎病毒比活性为8×103～1.6×104U/mg.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪明	中国农业大学动物医学院	260	2264	23.0	31.0
2	夏春	中国农业大学动物医学院	68	1187	22.0	31.0
3	吴文学	中国农业大学动物医学院	29	418	10.0	20.0
4	蒋金书	中国农业大学动物医学院	72	1194	20.0	30.0