提高抗地高辛人单链抗体在大肠杆菌分泌型表达的研究

• 作者: 乔媛媛 刘德新 李小鹰 王欲晓 王琰
• 来源期刊: 军医进修学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: 抗体,单克隆 大肠杆菌 地高辛
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 25-27
• 页数: 3页
• 分类号: R392.11
• 字数: 2271字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-1139.2002.01.008

摘要

目的:提高从半合成噬菌体抗体库中克隆的抗地高辛(Dig) 人单链抗体(ADA scFv)在大肠杆菌(E.coli)的分泌表达水平.方法:①通过PCR从表达质粒pHEN2-ADA scFv扩增ADA scFv基因并重组于质粒p3MH构建表达质粒p3MH-ADA scFv后,转化到E.coli XL1-blue及HB2151; ②ADA scFv分别在带有上述2种表达质粒的E.coli HB2151 以及带有表达质粒p3MH-ADA scFv的E.coli XL1-blue进行表达,通过ELISA分析培养基上清中的可溶性ADA scFv;③在培养基中加入蔗糖、甘氨酸及Triton X-100,通过ELISA分析培养基上清中的可溶性ADA scFv.结果:①ADA scFv 在含表达质粒p3MH-ADA scFv的E.coli HB2151 及XL1-blue的分泌型表达水平比pHEN2-E.coli HB2151 表达系统高约 5 倍;②在培养基中加入蔗糖,可使ADA scFv 在含有表达质粒p3MH-ADA scFv的E.coli HB2151 及XL1-blue表达系统的分泌型表达提高 5 倍多.结论:通过采用不同的载体-E.coli表达系统以及在培养基中加入不被代谢的蔗糖,可使ADA scFv的分泌型表达提高 25 倍多.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李小鹰	解放军总医院南楼六科	405	2442	23.0	32.0
2	乔媛媛	海军总医院中心实验科	45	153	7.0	10.0
3	王琰	海军总医院中心实验科	59	302	9.0	14.0
4	王欲晓	海军总医院中心实验科	29	62	5.0	5.0
5	刘德新	解放军总医院南楼六科	13	165	5.0	12.0