中国版纳猪MHCI类P1分子全长的原核表达与纯化

• 作者: 周光炎 周洪 唐军 李宁丽 沈伯华 王颖 陈福祥
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 地球科学
• 关键词: 版纳猪 猪白细胞抗原 大肠杆菌 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 移植免疫学
• 页码范围: 264-267
• 页数: 4页
• 分类号: P392.11
• 字数: 4173字
• 语种: 中文

摘要

目的:获得原核表达的中国版纳猪SIAI类P1蛋白质分子.方法:PCR扩增去信号肽的SIAl类P1 cDNA序列,亚克隆至pCEMT载体,测序.将亚克隆的P1 cDNA片段插入表达载体pET42b(+),构建重组表达质粒pET-42b(+)/sla-p1,转化E-coli表达菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL,IFIG诱导P1-8×his融合蛋白表达,经包涵体洗涤,8mol/L尿素变性溶解,Ni2+亲和层析,梯度透析后,定量保存.SDS-PAGE、western-blotting鉴定目的蛋白的表达与纯化.结果:目的蛋白(分子量39.5 kD)表达量占细菌总蛋白15%,每升表达菌获得纯度95%的目的蛋白40mg～60mg.结论:成功建立猪SLA分子全长原核表达、纯化体系,为建立间接识别猪移植抗原SLAI类分子的人T细胞系及表位分析打下基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周光炎	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	58	348	11.0	14.0
2	唐军	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	8	29	3.0	5.0
3	王颖	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	48	311	10.0	14.0
4	周洪	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	11	85	6.0	9.0
5	李宁丽	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	32	268	10.0	15.0
6	陈福祥	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	4	38	3.0	4.0
7	沈伯华	上海第二医科大学上海市免疫学研究所	2	11	1.0	2.0