人血管抑制素在酿酒酵母中的分泌表达和活性鉴定

• 作者: 卢文菊 张晓实 李文清 罗进贤
• 来源期刊: 中国生物化学与分子生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人血管抑制素 酿酒酵母 基因表达与分泌 纯化 活性鉴定
• 年，卷（期）: 2002,（2）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 156-160
• 页数: 5页
• 分类号: Q78|R338
• 字数: 3823字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-7626.2002.02.009

摘要

将酵母交配因子(MF)α1信号肽编码序列和人血管抑制素(hAGN)cDNA融合序列插入穿梭载体pYADE4,构建得到分泌型重组表达质粒pYADEMA18.转化酿酒酵母JG1107后,用2%乙醇和2%甘油联合诱导表达.ELISA分析表明,在诱导14 h～30 h期间,hAGN获得了表达并分泌至细胞外.发酵上清液经75%饱和度硫酸铵沉淀、CM-52纤维素离子交换层析和Superdex-75凝胶过滤层析纯化.SDS-PAGE分析显示,表达产物重组人血管抑制素(rhAGN)相对分子质量约50 kD,电泳纯度达到94%.生物活性分析证明,rhAGN在0.01 mg/L～3.0 mg/L浓度范围内能够抑制人真皮内皮细胞株HDMEC增殖,抑制作用随剂量的增加而增强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	罗进贤	中山大学生命科学学院	43	262	9.0	14.0
2	李文清	中山大学生命科学学院	6	59	4.0	6.0
3	卢文菊	广州医学院临床生物化学教研室	12	53	4.0	6.0
4	张晓实	中山医科大学肿瘤研究所	7	32	3.0	5.0