弓形虫表面抗原P22编码基因片段的亚克隆与表达

• 作者: 占国清 吴少庭 林敏 梁驹卿 高世同
• 来源期刊: 中国寄生虫病防治杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 弓形虫 P22表面抗原 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2002,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 24-26
• 页数: 3页
• 分类号: R382.5
• 字数: 2678字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-5234.2002.01.008

摘要

目的亚克隆弓形虫RH株表面抗原P22编码基因,构建表达质粒pBK/P22,并对其在大肠杆菌(E.coli)中的表达作初步研究. 方法以限制性内切酶BamHⅠ和KpnⅠ双酶切质粒pBCG5.6/P22,获得弓形虫表面抗原P22编码基因目的片段,在以低熔点琼脂糖回收纯化后,插入表达质粒载体pBK-CMV的多克隆位点,构建重组体pBK/P22,并转化大肠杆菌DH 5α,快速酚法初筛阳性重组子,阳性克隆以PCR法与限制性酶切分析鉴定后,以IPTG进行诱导在E.coli DH 5α中表达,表达产物以SDS-PAGE与免疫印迹分析. 结果双酶切质粒pBCG5.6/P22,获得约593 bp的P22编码基因片段,与预期片段大小相符;所构建pBK/P22重组体阳性克隆经双酶切和PCR鉴定与预期结果一致;SDS-PAGE与免疫印迹显示,表达产物的大小约28 ku. 结论成功亚克隆并构建了弓形虫表面抗原P22编码基因pBK/P22表达质粒,诱导表达了弓形虫P22表面抗原蛋白,为抗原免疫特性的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁驹卿		13	82	6.0	9.0