Hegf和hbFGF的C端(78-154aa)融合蛋白的表达、纯化及活性测定

• 作者: 余榕捷 孙奋勇 张玲 李志英 林剑 蒲含林 谢秋玲
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 人类 表皮生长因子-尿抑胃素 成纤维细胞生长因子,碱性 重组融合蛋白类 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 367-370
• 页数: 4页
• 分类号: Q786
• 字数: 3261字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2002.04.008

摘要

目的:将人表皮生长因子(hEGF)与人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)的C端连接,构建出既可与肝素结合,又具有促进细胞生长活性的融合蛋白,并在大肠杆菌中高效表达.方法: 将PCR扩增hEGF全基因与PCR扩增hbFGF 5端的231 bp的片段连接,克隆到表达载体pJN,构建出含融合基因的表达质粒pJRH.将pJRH转化BL21(DE3)表达菌株,获得融合蛋白的表达菌株pJRH(BL).Western blot检测表达产物免疫学活性.表达产物上肝素亲和柱和分子筛进行纯化.结果: 融合蛋白表达产量为30%,融合蛋白不仅能与肝素结合,而且具有促细胞增殖的活性.Western blot检测结果显示融合蛋白有EGF的免疫活性.融合蛋白的等电点为5.2.结论: 本研究构建了一个hEGF和hbFGF的C端的融合蛋白,该蛋白基本保持了两者原有的生物活性.作为一个新的活性因子,本研究为探讨活性因子蛋白结构与功能的关系奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	林剑	暨南大学生物工程研究所	49	553	13.0	21.0
2	张玲	暨南大学生物工程研究所	21	122	6.0	10.0
3	孙奋勇	暨南大学生物工程研究所	67	545	11.0	20.0
4	李志英	暨南大学生物工程研究所	13	69	4.0	8.0
5	谢秋玲	暨南大学生物工程研究所	60	665	13.0	24.0
6	蒲含林	暨南大学生物工程研究所	36	307	10.0	16.0
7	余榕捷	暨南大学生物工程研究所	37	174	6.0	12.0